光學(xué)顯微鏡是一種精密的光學(xué)儀器。當(dāng)前使用的顯微鏡由一套透鏡配合，因而可選擇不同的放大倍數(shù)對(duì)物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)進(jìn)行放大觀察。普通光學(xué)顯微鏡通常能將物體放大1500～2000 倍(*大的分辨力為0.2μm)。

　　壹

　　光學(xué)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)

　　☆ 數(shù)字為顯微鏡組成部件，字母為顯微鏡可操作調(diào)節(jié)部件。(圖片展示機(jī)型為奧特光學(xué)BK6000生物顯微鏡）

　　顯微鏡組成部件名稱：

　?、? 目鏡

　　②. 附件模塊盒

　?、? 物鏡

　?、? 切片夾

　?、? 不脫出載物臺(tái)

　　⑥. 搖出式聚光鏡

　?、? 視場(chǎng)光欄

　　⑧. 主機(jī)

　?、? 三筒目鏡觀察筒

　?、? 聚光鏡支架

　　前側(cè)及右手區(qū)域涉及到的操作部件名稱：

　　A. 屈光度調(diào)節(jié)圈

　　B. 左右目鏡筒

　　C. 物鏡轉(zhuǎn)換器

　　D. 孔徑光欄調(diào)節(jié)撥盤

　　E. 視場(chǎng)光欄調(diào)中手柄

　　F. 視場(chǎng)光欄調(diào)節(jié)撥盤

　　G. 攝像目鏡鎖緊螺釘手柄

　　H. 攝像觀察轉(zhuǎn)換拉桿

　　I. 觀察筒安裝鎖緊螺釘

　　J. 聚光鏡安裝鎖緊螺釘手柄

　　K. 不脫出載物臺(tái)縱向移動(dòng)手輪

　　L. 不脫出載物臺(tái)橫向移動(dòng)手輪

　　M. 亮度調(diào)節(jié)旋鈕

　　N. 右微動(dòng)調(diào)焦手輪

　　O. 右粗動(dòng)調(diào)焦手輪

　　1

　　光學(xué)部分

　　包括目鏡、物鏡、聚光器和光源等。

　?。?）目鏡

　　通常由兩組透鏡組成，上端的一組又稱為“接目鏡”，下端的則稱為“場(chǎng)鏡”。兩者之間或在場(chǎng)鏡的下方裝有視場(chǎng)光闌（金屬環(huán)狀裝置），經(jīng)物鏡放大后的中間像就落在視場(chǎng)光闌平面上，所以其上可加置目鏡測(cè)微尺。在目鏡上方刻有放大倍數(shù)，如10×、20×等。按照視場(chǎng)的大小，目鏡可分為普通目鏡和廣角目鏡。有些顯微鏡的目鏡上還附有視度調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)，操作者可以對(duì)左右眼分別進(jìn)行視度調(diào)整。另有照相目鏡(NFK)可用于拍攝。

　?。?）物鏡

　　由數(shù)組透鏡組成，安裝于轉(zhuǎn)換器上，又稱接物鏡。通常每臺(tái)顯微鏡配備一套不同倍數(shù)的物鏡，包括：

　　①低倍物鏡：指 1×～6×；

　?、谥斜段镧R：指 6×～25×；

　?、鄹弑段镧R：指 25×～63×；

　?、苡徒镧R：指 90×～100×。

　　其中油浸物鏡使用時(shí)需在物鏡的下表面和蓋玻片的上表面之間填充折射率為1.5左右的液體（如香柏油等），它能顯著地提高顯微觀察的分辨率。其他物鏡則直接使用。觀察過(guò)程中物鏡的選擇一般遵循由低到高的順序，因?yàn)榈捅剁R的視野大，便于查找待檢的具體部位。顯微鏡的放大倍數(shù)，可粗略視為目鏡放大倍數(shù)與物鏡放大倍數(shù)的乘積。

　　（3）聚光器

　　由聚光透鏡和虹彩光圈組成，位于在載物臺(tái)下方。聚光透鏡的功能是將光線聚焦于視場(chǎng)范圍內(nèi)；透鏡組下方的虹彩光圈可開大縮小，以控制聚光器的通光范圍，調(diào)節(jié)光的強(qiáng)度，影響成像的分辨力和反差。使用時(shí)應(yīng)根據(jù)觀察目的，配合光源強(qiáng)度加以調(diào)節(jié)，得到*佳成像效果。

　?。?）光源

　　較早的普通光學(xué)顯微鏡借助鏡座上的反光鏡，將自然光或燈光反射到聚光器透鏡的中央作為鏡檢光源。反光鏡是由一平面和另一凹面的鏡子組成。不用聚光器或光線較強(qiáng)時(shí)用凹面鏡，凹面鏡能起會(huì)聚光線的作用；用聚光器或光較弱時(shí)，一般都用平面鏡。新近出產(chǎn)的顯微鏡一般直接在鏡座上安裝光源，并有電流調(diào)節(jié)螺旋，用于調(diào)節(jié)光照強(qiáng)度。光源類型有鹵素?zé)?、鎢絲燈、汞燈、熒光燈、金屬鹵化物燈等。

　　顯微鏡的光源照明方法分為兩種：透射型與反射(落射)型。前者是指光源由下而上通過(guò)透明的鏡檢對(duì)象；反射型顯微鏡則是以物鏡上方打光到(落射照明)不透明的物體上。

　　2

　　機(jī)械部分

　　包括鏡座、鏡柱、鏡壁、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺(tái)和準(zhǔn)焦螺旋等。

　?。?）鏡座

　　基座部分，用于支持整臺(tái)顯微鏡的平穩(wěn)。

　?。?）鏡柱

　　鏡座與鏡臂之間的直立短柱，起連接和支持的作用。

　?。?）鏡臂

　　顯微鏡后方的弓形部分，是移動(dòng)顯微鏡時(shí)握持的部位。有的顯微鏡在鏡臂與鏡柱之間有一活動(dòng)的傾斜關(guān)節(jié)，可調(diào)節(jié)鏡筒向后傾斜的角度，便于觀察。

　?。?）鏡筒

　　安裝在鏡臂先端的圓筒狀結(jié)構(gòu)，上連目鏡，下連接物鏡轉(zhuǎn)換器。顯微鏡的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)筒長(zhǎng)為160 mm，此數(shù)字標(biāo)在物鏡的外殼上。

　?。?）物鏡轉(zhuǎn)換器

　　鏡筒下端的可自由旋轉(zhuǎn)的圓盤，用于安裝物鏡。觀察時(shí)通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器來(lái)調(diào)換不同倍數(shù)的物鏡。

　?。?）載物臺(tái)

　　鏡筒下方的平臺(tái)，中央有一圓形的通光孔。用于放置載玻片。載物臺(tái)上裝有固定標(biāo)本的彈簧夾，一側(cè)有推進(jìn)器，可移動(dòng)標(biāo)本的位置。有些推動(dòng)器上還附有刻度，可直接計(jì)算標(biāo)本移動(dòng)的距離以及確定標(biāo)本的位置。

　　（7）準(zhǔn)焦螺旋

　　裝在鏡臂或鏡柱上的大小兩種螺旋，轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)可使鏡筒或載物臺(tái)上下移動(dòng)，從而調(diào)節(jié)成像系統(tǒng)的焦距。大的稱為粗準(zhǔn)焦螺旋，每轉(zhuǎn)動(dòng)一圈，鏡筒升降10mm；小的為細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，轉(zhuǎn)動(dòng)一圈可使鏡筒僅升降0.1mm。一般在低倍鏡下觀察物體時(shí)，以粗準(zhǔn)焦螺旋迅速調(diào)節(jié)物像，使之位于視野中。在此基礎(chǔ)上，或在使用高倍鏡時(shí)，用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋微調(diào)。必須注意，一般顯微鏡裝有左右兩套準(zhǔn)焦螺旋，作用相同，但切勿兩手同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)兩側(cè)的螺旋，防止因雙手力量不均產(chǎn)生扭力，導(dǎo)致螺旋滑絲。

　　二

　　普通光學(xué)顯微鏡的基本成像原理

　　光線→（反光鏡）→遮光器→通光孔→鏡檢樣品（透明）→物鏡的透鏡（**次放大成倒立實(shí)像）→鏡筒→目鏡（再次放大成虛像）→眼。

　　三

　　普通光學(xué)顯微鏡的使用過(guò)程

　　1．鏡檢前的準(zhǔn)備

　　室內(nèi)應(yīng)清潔而干燥，實(shí)驗(yàn)臺(tái)臺(tái)面水平，穩(wěn)固無(wú)震動(dòng)，顯微鏡附近不應(yīng)放置腐蝕性的試劑。從顯微鏡柜或鏡箱內(nèi)取出顯微鏡時(shí)，要用右手緊握鏡臂，左手托住鏡座，平穩(wěn)地取出，放置在實(shí)驗(yàn)臺(tái)桌面上，置于操作者左前方，距實(shí)驗(yàn)臺(tái)邊緣約10cm，鏡臂朝自己，鏡筒朝前。實(shí)驗(yàn)臺(tái)右側(cè)放繪圖用具。

　　2．調(diào)節(jié)光源

　　如需利用外置光源，宜采用散射的自然光或柔和的燈光。直射的太陽(yáng)光會(huì)對(duì)觀察者的眼睛造成傷害。轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使低倍鏡正對(duì)通光孔，將聚光器上的虹彩光圈開到*大，觀察目鏡中視野亮度，同時(shí)調(diào)節(jié)反光鏡角度，使光照達(dá)到*明亮*均勻。自帶光源的顯微鏡，可通過(guò)調(diào)節(jié)電流旋鈕來(lái)調(diào)節(jié)光照的強(qiáng)弱。

　　3．裝置待檢玻片

　　將待觀察的樣品制作成臨時(shí)或**裝片，放在載物臺(tái)上，用彈簧夾固定，有蓋玻片的一面朝上。移動(dòng)推進(jìn)器，調(diào)節(jié)待檢樣品至通光孔的中心。

　　4．低倍鏡觀察

　　將低倍鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔，緩緩轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，將物鏡與裝片的距離調(diào)至*近。注意不要壓碎蓋玻片。通過(guò)目鏡觀察，同時(shí)用粗準(zhǔn)焦螺旋緩慢調(diào)節(jié)，直至物像出現(xiàn)，再用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋微調(diào)，同時(shí)調(diào)節(jié)光源亮度與虹彩光圈的大小，使物像達(dá)到*清晰的程度。并利用推進(jìn)器把需要進(jìn)一步放大觀察的部分移至視野中央。如果使用雙筒目鏡，應(yīng)在觀察前先調(diào)整雙筒距離，使兩眼視場(chǎng)合并。

　　5．高倍鏡觀察

　　轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，選擇較高倍數(shù)的物鏡，用 細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)節(jié)焦距，到 物像清晰為止。

　　6．油鏡觀察

　　油浸物鏡的工作距離（指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離）很短，一般在0.2 mm 以內(nèi)，且一般光學(xué)顯微鏡的油浸物鏡沒(méi)有“彈簧裝置”，因此使用油浸物鏡時(shí)，調(diào)焦速度必須放慢，避免壓碎玻片，并使物鏡受損。

　?。?）在低倍鏡下找到觀察目標(biāo)，中、高倍鏡下逐步放大，將待觀察部位置于視野中央，調(diào)節(jié)光源和虹彩光圈，使通過(guò)聚光器的光亮達(dá)到*大。

　?。?）轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，將鏡筒上旋（或?qū)⑤d物臺(tái)下降）約2 cm，加一小滴香柏油于玻片的鏡檢部位上。

　　（3）將 粗準(zhǔn)焦螺旋緩緩轉(zhuǎn)回 ，同 時(shí)注意從側(cè)面觀察，直 至油鏡浸入油滴，鏡 頭幾乎與標(biāo)本接觸。

　?。?）從目鏡中觀察，用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋微調(diào)，直至物象清晰。

　?。?）鏡檢結(jié)束后，將鏡頭旋離玻片，立即清潔鏡頭。一般先用擦鏡紙擦去鏡頭上的香柏油滴。再用擦鏡紙蘸少許乙醚酒精混合液（2：3），擦去殘留油跡，*后再用干凈的擦鏡紙擦凈（注意向一個(gè)方向擦拭）。

　　7．還原顯微鏡

　　關(guān)閉內(nèi)置光源并拔下電源插頭，或使反光鏡與聚光器垂直。旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器，使物鏡頭呈八字形位置與通光孔相對(duì)。再將鏡筒與載物臺(tái)距離調(diào)至*近，降下聚光器。罩上防塵罩，將顯微鏡放回柜內(nèi)或鏡箱中。

　　接下來(lái)分享的是：

　　顯微鏡知識(shí)（二）：幾種特殊的光學(xué)顯微鏡及區(qū)別！

　　顯微鏡知識(shí)（三）：電子顯微鏡