超景深顯微鏡的成像原理可以清晰地歸納為以下幾點(diǎn):
基本概述:
超景深顯微鏡是20世紀(jì)80年代發(fā)展起來的一種新的顯微技術(shù)。
它通過利用光學(xué)聚焦原理,分層檢測確定高度值,再重構(gòu)成三維形貌,實(shí)現(xiàn)了大景深和超高分辨率觀測。
工作原理:
光學(xué)系統(tǒng):
透鏡系統(tǒng)是構(gòu)成該系統(tǒng)的主要部件,用于匯聚光線、折射光線以及全反射。
照明系統(tǒng)提供光源,將光線照亮并聚焦到被觀察物體表面,控制照射光的強(qiáng)度。
成像技術(shù):
超景深顯微鏡采用先進(jìn)的成像技術(shù),包括多焦點(diǎn)成像、波前感應(yīng)成像和計(jì)算成像。
多焦點(diǎn)成像:在樣品不同部分同時聚焦并捕獲圖像,然后將這些圖像合成一個具有擴(kuò)展焦深度的圖像。
波前感應(yīng)成像:利用波前感應(yīng)技術(shù)實(shí)時調(diào)整鏡頭或樣品的形狀,以保持多個焦平面的清晰圖像。
計(jì)算成像:利用計(jì)算方法將不同焦平面的圖像融合成一個擴(kuò)展焦深度的圖像。
成像過程:
光源通常使用白光或單色光源,以提供足夠的照明。
物鏡具有高數(shù)值孔徑和長工作距離,能夠收集到更多散射光,并保持圖像的清晰度和對比度。
分束器將入射光分為兩個路徑,一部分光經(jīng)過樣本直接透射,另一部分光經(jīng)過相位調(diào)制,形成參考波。
相位調(diào)制通過改變光的相位來增強(qiáng)被觀察對象的邊緣信息,并提高景深范圍。
接收器接收樣品透射的光并將其轉(zhuǎn)換為電信號,然后經(jīng)過放大和處理后送入探測器。
探測器將光信號轉(zhuǎn)換為數(shù)字圖像。
圖像處理和重構(gòu)通過對接收到的圖像進(jìn)行算法處理,如相位解調(diào)、反射計(jì)算等,可以重構(gòu)出具有超大景深的圖像。
主要特點(diǎn):
分辨力高,空間分辨率可達(dá)10^-12cm。
能觀察到微量的結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié),圖像質(zhì)量好。
具有很高的放大倍率,可用于多種不同的工作方式。
同時觀測多個目標(biāo),容易實(shí)現(xiàn)自動化。
適用于任何種類的標(biāo)本,如細(xì)胞和生物組織等細(xì)微結(jié)構(gòu)。
超景深顯微鏡的成像原理體現(xiàn)了其技術(shù)的先進(jìn)性和對細(xì)微結(jié)構(gòu)的精確捕捉能力,使得它在科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用中具有廣泛的應(yīng)用前景。