顯微鏡是由于刀和標(biāo)本之間發(fā)生高頻率的展顫,顯微鏡以致在切片上產(chǎn)生與刀刃平行的波紋.這是一種*常見(jiàn)的故障.如果標(biāo)本塊硬度不適〔常常是過(guò)軟);組織塊兩相對(duì)夾角過(guò)小;包埋塊在樣品夾上伸出太長(zhǎng);切速太高或刀鈍等都會(huì)產(chǎn)生頗痕.
顯微鏡刀痕:它是與刀刃垂直的劃痕。這是由于刀口不整或標(biāo)本中夾有硬顆粒所致。切片的刀痕處在電子束的轟擊下可以撕裂.排除的方法是更換新刀或修除異物。
顯微鏡切片厚薄不均或空切:原因是刀刃各部位稅利程度不一或包埋劑混合不均,向組織塊滲透不好、引起不規(guī)則的聚合、顯微鏡造成標(biāo)本硬度不一致。顯微鏡若切片時(shí)有震動(dòng),也會(huì)產(chǎn)生厚薄不均的果這類(lèi)情況嚴(yán)重便可以出現(xiàn)空切。
用電子顯微鏡觀察超薄切片時(shí),要具有一定的反差,才能得到清晰的圖像。雖然用0sq固定組織時(shí)已起到一定的電子染色作用,顯微鏡但在高分辨能力的電鏡下觀察時(shí),要求切片要薄,還需進(jìn)一步補(bǔ)充染色,增加反差,顯微鏡一般用重金屬鹽染色。顯微鏡因它能與一定的細(xì)胞結(jié)構(gòu)結(jié)合,生物顯微鏡且重金屬的原子對(duì)電子具有較強(qiáng)的散射能力,呈暗像,反之則成明像,因而顯出明、暗的反差,顯微鏡可使圖像十分清晰.這樣的染色叫正染。用于超薄切片染色的重金屬鹽有鈾鹽和鉛鹽。
醋酸鈾染液的配制:顯微鏡將醋酸鈾(UOE (CZH,仇):.2HZOUranium acetate或Uranyl acetate)溶于50%-70%乙醉中直至飽和,靜置1-2天,顯微鏡使未溶的部份沉淀,取上部黃色透明溶掖使用.配制后避光保存。
將上述試劑置入50m1容量瓶?jī)?nèi),顯微鏡加入30m1的雙蒸水,振蕩1分鐘,然后不斷搖動(dòng)30分鐘,顯微鏡直至全部硝酸鉛都轉(zhuǎn)變?yōu)槿榘咨珮?gòu)椽酸鉛絡(luò)合物,至容量瓶底無(wú)結(jié)晶殘留為止。再向瓶?jī)?nèi)加入IN氫氧化鈉8ml,顯微鏡搖動(dòng)后乳白色的絡(luò)合物溶解而成為無(wú)色透明溶液,*后加雙蒸水至50m1搖勻備用。溶液的pH約12.0士。.1。顯微鏡如出現(xiàn)沉淀,離心后再用.一次配制后*多用半年。體視顯微鏡配制時(shí)鉛鹽需用新近產(chǎn)品,顯微鏡價(jià)格或者將鉛鹽純化后再用。